氣相色譜儀廠家，武漢泰特沃斯科技有限公司專業(yè)生產(chǎn)氣相色譜儀、便攜式色譜儀。以下由武漢泰特沃斯科技有限公司色譜技術(shù)人員主要介紹氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定茶葉中32種殺菌劑殘留。

殺菌劑是用于防治由病原微生物引起的植物病害的一類農(nóng)藥。近年來殺菌劑大量生產(chǎn)和使用，農(nóng)藥殘留問題正引起各國的重視，成為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全關(guān)注的焦點(diǎn)。農(nóng)藥殘留不僅對環(huán)境產(chǎn)生影響，同時危害了人類身體健康。如百菌清對眼睛和皮膚均有刺激，可能會產(chǎn)生過敏性反應(yīng)并引起皮炎或紅疹,歐盟和世界自然基金把三唑酮列為具有生殖和內(nèi)分泌干擾毒性的殺菌劑。隨著公眾對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全關(guān)注度的提升，殺菌劑殘留也備受關(guān)注，作為農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)出口大國。在世界經(jīng)濟(jì)一體化趨勢不斷加快的今天，發(fā)達(dá)國家將農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)作為限制我國農(nóng)產(chǎn)品出口的新一輪技術(shù)壁壘，歐盟更新了農(nóng)藥殘留新標(biāo)準(zhǔn)(EC 149/2008)，有關(guān)茶葉的農(nóng)藥殘留最高限量標(biāo)準(zhǔn)也更加嚴(yán)格，對大多數(shù)農(nóng)藥采用方法檢出限最為最大殘留量。日本的“肯定列表制度”，將所有的農(nóng)業(yè)化學(xué)品殘留納入管理體系，其最大殘留限量的標(biāo)準(zhǔn)也越來越苛刻。所以研究該類殺菌劑殘留量檢測方法具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

目前，有關(guān)殺菌劑類農(nóng)藥殘留的檢測方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、液相色譜和液相色譜-質(zhì)譜法，現(xiàn)有的報(bào)道多數(shù)是關(guān)于單種殺菌劑檢測方法的研究，但是同時測定霜霉威、嘧霉胺、甲霜靈等32種殺菌劑的檢測工作尚未報(bào)道。當(dāng)前，農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)普遍趨向于高靈敏度、高通量、高穩(wěn)定性分析，為了更好、更快地適應(yīng)此類農(nóng)藥殘留檢測的需求，開發(fā)一種高效、全面的殺菌劑農(nóng)藥檢測方法十分必要。本研究選用茶葉作為分析對象，采用改進(jìn)的QuEChERS方法進(jìn)行凈化，通過優(yōu)化提取溶劑以及凈化劑的用量，優(yōu)化前處理方法，并考查了分析過程中的基質(zhì)效應(yīng)，建立了茶葉中32種殺菌劑殘留的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置 單標(biāo)儲備液：分別稱取5 mg(精確至0.01 mg)各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用丙酮定容于10 mL容量瓶中，置于 -20℃保存。混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：為確保較高的靈敏度及精確度，將農(nóng)藥分成兩組。分別移取一定單標(biāo)儲備液，用丙酮定容，配置成濃度為10 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，置于 -20℃保存?？瞻谆|(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：準(zhǔn)確移取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，用空白樣品提取液配制成系列空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

樣品前處理 準(zhǔn)確稱取樣品2 g(精確到0.01 g)于50 mL 離心管中，加入3 g氯化鈉、10 mL乙腈，以10 000 r·min-1 高速均質(zhì)1 min后超聲提取30 min，以5 000 r·min-1 離心5 min，取上清液，再重復(fù)提取1次，合并上清液，待凈化。

將上清液加入QuEChERS試劑盒中(包含400 mg PSA/400 mg C18/1 200 mg MgSO4 /100 mg GCB)，漩渦振蕩10 min，提取液凈化后，以5 000 r·min-1離心5 min，將上清液轉(zhuǎn)移至另一潔凈試管中，氮吹至干，丙酮定容至1 mL，過0.22 μm濾膜，供 GC-MS/MS分析。

氣相色譜條件：色譜柱為Rxi-5 Sil MS(30 m, 0.25 mm×0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度250℃；柱溫：柱溫箱初始溫度為60℃，保持 2 min，以30℃·min-1升至220℃，保持2 min，再以2℃·min-1升至230℃，保持2 min, 以8℃·min-1升至280℃，保持10 min，最后以15℃·min-1升至300℃，不保持；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1 μL；載氣：高純氦氣(99.999%)，恒定流速：1 mL·min-1。

質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源(EI源)；離子源電壓：70 eV；離子源溫度：200℃；接口溫度：250℃；溶劑延遲2 min；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)，每種殺菌劑選取3個特征離子碎片，32種待測組分的保留時間、母離子、特征離子碎片、碰撞電壓見表1。

空白基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線 將兩組混合標(biāo)準(zhǔn)工作液分別用空白基質(zhì)提取液稀釋為10、20、100、500、1 000 μg·L-1的系列工作液，以及20、50、100、500、1 000 μg·L-1系列工作液，采用外標(biāo)法定量。以峰面積為縱坐標(biāo)，溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線。

色譜、質(zhì)譜條件對待測物的峰形、靈敏度和穩(wěn)定性等產(chǎn)生影響。將32種殺菌劑分成2組，采用程序升溫，盡量分離各種農(nóng)藥，以消除農(nóng)藥之間的相互干擾，進(jìn)行不同時段的離子對掃描，以提高穩(wěn)定性及重現(xiàn)性。通過Smart Database MRM優(yōu)化工具確定各組分的碎片離子信息，及最優(yōu)的碰撞電壓，建立多反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)。選擇合適的分段掃描窗口，以提高分析靈敏度。

本研究比較了乙腈、乙腈∶丙酮(V/V: 1∶1)、乙腈∶乙酸乙酯(V/V: 1∶1)、丙酮∶乙酸乙酯(V/V: 1∶1)4種不同提取溶劑對目標(biāo)農(nóng)藥的提取效率，可能是由于乙腈對殺菌劑農(nóng)藥的溶解度較大，提出雜質(zhì)較少，提取效果較好。最終選用乙腈作為提取溶劑對茶葉中32種殺菌劑進(jìn)行提取。

樣品前處理主要包括樣品提取和凈化，是農(nóng)藥殘留分析技術(shù)的關(guān)鍵。本研究對前處理?xiàng)l件進(jìn)行優(yōu)化，以乙腈為提取溶劑，通過采用改進(jìn)傳統(tǒng)的QuEChERS方法，以400 mg PSA/400 mg C18/1 200 mg MgSO4/100 mg GCB為凈化劑，取得理想的提取及凈化效果。并且采用空白基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，基本可以消除基質(zhì)效應(yīng)帶來的影響。

結(jié)果顯示，茶葉中32種殺菌劑的平均添加回收率為70.4%～109.1%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)范圍在3.4%～10.3%，27種殺菌劑在10～1 000 μg·L-1, 5種殺菌劑在20～1 000 μg·L-1范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)(R2)均大于0.99。方法檢出限(S/N≥3)為0.1～8.1 μg·L-1，定量限(S/N≥10)為0.4～23.4 μg·L-1。該檢測方法的回收率、重現(xiàn)性、靈敏度均能滿足定量分析的要求。本研究建立了茶葉中32種殺菌劑類農(nóng)藥殘留的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)測定方法。所建立的方法能明顯改善基體效應(yīng)、提取效率高、檢測靈敏度高，樣品處理操作簡單，在供試濃度范圍內(nèi)32種殺菌劑線性相關(guān)性良好，能夠滿足于茶葉中多種殺菌劑農(nóng)藥殘留的日常測定。