色譜理論塔板數(shù)(有效率)和分離度的測定
理論塔板數(shù)(N),色譜的柱效參數(shù)之一,(簡稱柱效)。N取決于固定相的種類、性質(zhì)(粒度、粒徑分布等)、填充狀況、柱長、流動相的種類和流速及測定柱效所用物質(zhì)的性質(zhì)。
分離度又稱分辨率,為了判斷分離物質(zhì)對色譜柱在色譜柱中的分離情況。常用分離度作為柱的總分離效能指標(biāo),用R表示。R等于相鄰色譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比。
以分析由硬脂酸甲酯和油酸甲酯按當(dāng)量比例組成的混合物(例如,由可可脂制得的甲酯)為例。合理選擇進(jìn)樣量、柱溫和載氣流量,使硬脂酸甲酯峰的最大值在溶劑峰出現(xiàn)后15min內(nèi)出現(xiàn)且達(dá)到滿標(biāo)的3/4。見圖1
圖1 理論塔板數(shù)(有效率)和分離度的測定
理論塔板數(shù)有效率由下式計算
分離度的計算
式中:
n——理論塔板數(shù);
R——分離度;
S——保留距離,mm,從色譜圖起點(diǎn)到硬脂酸甲酯最大峰間的距離;
w1——硬脂酸甲酯的峰寬,mm,是從曲線兩個拐點(diǎn)作切線與基線的交點(diǎn)間的距離;
w2——油酸甲酯的峰寬,mm,是從曲線兩個拐點(diǎn)作切線與基線的交點(diǎn)間的距離;
Y——硬脂酸甲酯與油酸甲酯最大峰間的距離,mm。
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