氣相色譜作為二十世紀(jì)五十年代出現(xiàn)的一項(xiàng)世界重大科技技術(shù)成就，到如今已經(jīng)走過(guò)了超過(guò)半個(gè)世界的蠻長(zhǎng)歲月。氣相色譜分析、分離的科學(xué)方法，被廣泛應(yīng)用于人類(lèi)生產(chǎn)生活的方方面面。本文是由武漢泰特沃斯科技有限公司色譜技術(shù)人員主要介紹 大豆中戊唑醇的氣相色譜分析方法研究。

建立氣相色譜測(cè)定大豆和植株中戊唑醇?xì)埩舻姆治龇椒?。樣品?jīng)丙酮提取、液-液分配、弗羅里硅土層析柱凈化后，采用氣相色譜氮磷檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定。在添加量為0.02～1.00 mg/kg范圍內(nèi)，戊唑醇在大豆和植株中的平均回收率分別為90.7% ～105.3%和93.2% ～100.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.1% ～8.9%和1.7% ～4.6%;方法的最低檢出量為1×10-10g，最低檢測(cè)濃度為0.01 mg/kg。該方法簡(jiǎn)單、快速，結(jié)果準(zhǔn)確，靈敏度、精密度和檢測(cè)限均符合農(nóng)藥殘留分析的要求。

戊唑醇(Tebuconazole)是一種羥乙基三唑類(lèi)衍生物，是拜耳公司于1986年研制的新一代高效廣譜型內(nèi)吸性殺菌劑，是甾醇脫甲基化抑制劑，可迅速通過(guò)植物的葉片和根系吸收并在體內(nèi)傳導(dǎo)和進(jìn)行均勻分布，導(dǎo)致生物膜的形成受阻而發(fā)揮殺菌活性，用于重要經(jīng)濟(jì)作物的種子處理或葉面噴灑，可有效防治禾谷類(lèi)作物的多種銹病和白粉病等病害。

關(guān)于戊唑醇的檢測(cè)方法國(guó)內(nèi)外均有報(bào)道，主要有氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜 -質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)。液相色譜采用紫外檢測(cè)器，選擇性差，樣品前處理過(guò)于復(fù)雜;GC-MS或LC-MS/MS法既可定性又能定量，是農(nóng)藥殘留分析方法發(fā)展的趨勢(shì)，但其分析儀器價(jià)格昂貴，設(shè)備投資較大，使其應(yīng)用受到一定限制，因此目前廣泛使用的是氣相色譜法。由于戊唑醇分子中含有三唑官能團(tuán)，因此可采用氣相色譜氮磷檢測(cè)器，該儀器是實(shí)驗(yàn)室常用的分析儀器，其檢出限較低，能達(dá)到殘留分析的要求。采用氣相色譜氮磷檢測(cè)器測(cè)定戊唑醇在香蕉、蘋(píng)果、花生中的殘留已有報(bào)道，但目前關(guān)于戊唑醇水乳劑在大豆中殘留分析方法的研究在國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。為此，筆者通過(guò)試驗(yàn)，建立了戊唑醇在大豆中的氣相色譜分析方法，以期為大豆中戊唑醇?xì)埩舻姆治鎏峁├碚撘罁?jù)。

樣品制備。植株樣品:取大豆植株莖葉200 g，剪成1 cm左右的小段，備用。大豆樣品:取大豆200 g，磨碎，備用。所有樣品在分析測(cè)試前均放入-20℃冰箱中保存。

樣品提取。取植株樣品20.0 g置于組織搗碎機(jī)中，加入100 ml丙酮，組織搗碎3 min。稱(chēng)取粉碎的大豆籽粒樣品20.0 g于100 ml具塞三角瓶中，加入80 ml丙酮，在水浴恒溫振蕩器上振蕩60 min后分別將植株和大豆樣品在鋪有助濾劑545的布氏漏斗中減壓抽濾，并用20 ml丙酮沖洗殘?jiān)?，濾液收集到250 ml分液漏斗中，加100 ml 10%氯化鈉溶液，并用石油醚分3次(40、40、40 ml)萃取，合并石油醚相，40℃減壓濃縮近干，植株樣品用正己烷定容至2 ml，氣相色譜測(cè)定，大豆樣品待柱凈化。

樣品凈化。依次在層析柱(12 mm×300 mm)中裝入高度為1 cm的無(wú)水硫酸鈉、2 g弗羅里硅土(5%脫活)和1 g中性氧化鋁、1 cm的無(wú)水硫酸鈉。首先用30 ml石油醚溶液預(yù)淋洗，待液面接近上層無(wú)水硫酸鈉底部時(shí)，加入樣品的石油醚溶解液，用8 ml石油醚溶液淋洗，再用50 ml乙酸乙酯與石油醚(5∶95，V/V)的混合溶液洗脫，全部棄去，再用80 ml乙酸乙酯與石油醚(1∶1，V/V)的混合溶液洗脫，收集洗脫液，在40℃水浴上濃縮近干，正己烷定容至2 ml，進(jìn)行氣相色譜測(cè)定。

儀器條件。色譜柱:毛細(xì)管柱HP-5(30.00 m×0.32 mm×0.25 μm);進(jìn)樣口溫度:250℃;檢測(cè)器溫度:340℃;氣體流速:載氣(氮?dú)?1 ml/min，空氣 60 ml/min，氫氣 3 ml/min;程序升溫(初始100℃保持1 min，以20℃/min升至260℃保持10 min);進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣量為1 μl。

提取溶劑的選擇。在三唑類(lèi)農(nóng)藥殘留分析中常用的提取溶劑有乙腈、丙酮、甲醇等。研究采用丙酮、乙腈、丙酮-甲醇作為提取溶劑進(jìn)行篩選。結(jié)果表明，用乙腈提取時(shí)，溶出的樣品雜質(zhì)、油脂較多;而用丙酮-甲醇提取時(shí)，時(shí)間較長(zhǎng)，不便于操作，且提取過(guò)程中易乳化;用丙酮提取時(shí)，提出物和溶出雜質(zhì)很少，有利于后續(xù)的鹽析和凈化，另外丙酮提取操作過(guò)程相對(duì)簡(jiǎn)單，提取效率也高，因此該試驗(yàn)最終選擇丙酮作為提取溶劑。

凈化方法的選擇。測(cè)定大豆中戊唑醇?xì)埩魰r(shí)，考慮到大豆中油脂和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)會(huì)干擾氣相色譜對(duì)待測(cè)組分的分離和測(cè)定，因此在測(cè)定前樣品需經(jīng)過(guò)凈化處理。試驗(yàn)采用層析柱凈化，分別考察弗羅里硅土柱、中性氧化鋁柱和弗羅里硅土與中性氧化鋁混合層析柱，測(cè)得戊唑醇平均回收率分別為78.6%、69.4%和98.8%。由于弗羅里硅土與中性氧化鋁混合層析柱能有效去除色素和脂肪，獲得較滿(mǎn)意的平均回收率，因此選擇弗羅里硅土與中性氧化鋁混合層析柱凈化。

同時(shí)對(duì)洗脫劑進(jìn)行了優(yōu)化，對(duì)不同體積比淋洗試劑進(jìn)行了洗脫效果試驗(yàn)。結(jié)果表明，以乙酸乙酯∶石油醚(5∶95，V/V)作洗脫劑時(shí)，雜質(zhì)容易被洗脫下來(lái)，干擾目標(biāo)峰的測(cè)定，戊唑醇的洗脫率僅為69.8%;以乙酸乙酯∶石油醚(1∶1，V/V)作洗脫劑時(shí)，洗脫效果較好，且不干擾目標(biāo)峰的測(cè)定，戊唑醇的洗脫率可達(dá)98.6%。因此，選擇乙酸乙酯:石油醚(1∶1，V/V)混合液為洗脫劑。

建立了快捷、簡(jiǎn)便檢測(cè)大豆中戊唑醇?xì)埩舻臍庀嗌V方法。該方法具有操作簡(jiǎn)便易行、結(jié)果準(zhǔn)確度和靈敏度較高的特點(diǎn)，方法線性關(guān)系良好，目標(biāo)物與雜質(zhì)分離完全，前處理操作快速，符合農(nóng)藥殘留分析的要求，為大豆中戊唑醇?xì)埩舻姆治鎏峁┝艘罁?jù)。